Western blot化学发光(ECL)时,条带特别弱势怎么回事啊?有哪些步骤是需要注意的吗?

2025-05-22 06:03:18
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回答1:

条带弱和整张膜发光原因是不同的。条带弱一般是因为表达量低,或者一抗的问题,比如质量不好或浓度太低或孵育时间太短。整张膜发光则是因为发光液的杂质含量太多,一抗洗涤不充分也可能导致整张膜发光。
把一抗、洗涤和封闭的原因排除之后,仍然有整张膜发光,那就是发光液的质量问题。所以选择质量好的发光液关乎实验成败。如果背景不高,条带很弱的话,我们一般是换用高灵敏度的发光液,从超敏的换成极敏的,一般都能解决。

回答2:

如前面这位朋友所说,抗体浓度,曝光时间都会影响,发光试剂也会有影响,选择合适的抗体非常关键,也要选择好的发光试剂,我们实验室用的炎熙生物的极敏型化学发光试剂盒,很好用,很节约抗体,灵敏度高,达到低飞克极的灵敏度,并且信号持续时间长,信号也很强,不会出现你所说的条带很弱的情况。可以去了解一下。祝实验顺利。