从PBMC中进一步分离T,B淋巴细胞,可采用哪些方法

先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物，然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离；或者利用流式细胞仪进行分选。

如果精确的话得用专门仪器了，要后续培养干扰小建议磁珠分，这个操作比较简单，对设备要求不高，如果是要纯度高推荐流式细胞术了，这个需要有分选的仪器，一般分析仪器只能分析比例。

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扩展资料：

操作步骤：

1、取外周静脉血，用肝素抗凝，加等量的Hank’s液并混匀。

2、将分层液加入试管中，用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。

3、置于水平离心机离心，1500r/min，10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面，呈白膜状。

4、用尖吸管吸取界面的细胞层，置于另一试管中，加入适量的Hank's液，混匀后以1000r/min，离心10min，弃上清。

5、同法洗涤细胞2次。

6、将细胞重悬于RPMI—1640培养液中，4℃保存备用。

参考资料来源：/baike.baidu.com/item/%E5%A4%96%E5%91%A8%E8%A1%80%E5%8D%95%E4%B8%AA%E6%A0%B8%E7%BB%86%E8%83%9E?fromtitle=PBMC&fromid=4930057"target="_blank"title="百度百科-外周血单个核细胞">百度百科-外周血单个核细胞

温度影响Ficoll密度的，18度恰好密度为1.077附近，能得到明显的梯度

FACS