原代培养最怕染菌，首先一定要做到无菌条件，取下的组织要依次经过酒精，含双抗缓冲液（PBS或D-HANKS），不含双抗缓冲液，漂洗数次。再者就是在剪碎组织时应该是越碎越好，一般要剪20-30分钟。最后就是培养液的PH一定要在所培养的细胞所需的范围内，原代一般加入20的血清（胎牛血清要好于小牛血清）
原代培养的细胞种类，分离或者不与组织分离，培养基等都会对它有影响的。
