做电镜固定,25%戊二醛怎么稀释到2.5
透射电镜物品制备步骤
物品, 透射电镜, 制备步骤
.取材:
组织块于1立毫米
二.固定:
2.5%戊二醛磷酸缓冲液配制固定2或更间
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
1%锇酸固定液固定 2-3
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
三.脱水:
50%乙醇 15-20
70%乙醇 15-20
90%乙醇 15-20
90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20
90%丙酮 15-20
4度冰箱内进行
100%丙酮 室温 15-20三
四.包埋:
纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4
纯丙酮+包埋液(1:2)室温 夜
纯包埋液 37度 2-3
五.固化:
37度烘箱内 夜
45度烘箱内 12
60度烘箱内 24
六.超薄切片机切片 50-60 nm
七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色
八.透射电镜观察拍片
由于物品含水太电镜真空蒸发掉破坏结构所需要些能够水温取代掉、并且自身没结构物质树脂包埋剂物脆弱、结构容易破坏所才需要温制才复杂物电镜制主要工作看电镜倒要物品超薄切片流程图: