亚磷酸三酯法

亚磷酸三酯法合成DNA的原理是什么？

2025-05-24 08:42:58

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回答1：

第一步，脱三苯甲基作用。用酸处理法．除去与核苷酸1的5’—OH基团偶联的保护基团DMT。第二步，偶联反应。通过一种弱喊——四唑的催化反应，使加进来的第二个核苷酸2同已附着在固相载体上的核核苷酸1之暴露的5’—OH基缩合。第三步，封端反应，由加入的乙酸酐激发的乙酰化作用没反应的OH封闭起来。第四步，氧化作用。在核苷酸1和2之间新形成的亚磷酸三酯键十分活跃：利用碘液催化作用．使之被氧化成为相当稳定的磷酸三酯键。
四、固相亚磷酸三酯法合成寡核苷酸在下一个合成周期之前．要把附着在最后一个偶联核苷酸上的二甲氧基三苯甲基（DMT）移去．以保证它的5端OH基团能够暴露出来，同下一个活化的脱氧单核苷酸进行偶联反应。 DMT是一种显色指示剂，所以它的释放可以用来检测偶联反应的效率。