用碱裂解法提取质粒DNA的,加入溶液1,容液2,容液3后各有哪些现象,原因是什么?

2025-03-25 15:50:00
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回答1:

溶液2中的主要成分是NaOH和SDS,是用来裂解细胞的。因为NaOH遇到二氧化碳容易反应生成碳酸氢钙,影响使用效果,因此要现配现用。SDS的话,低温容易产生沉淀。不过在37°C 水浴一下就好。主要还是NaOH的问题。

溶液1主要是让菌体细胞充分悬浊于溶液,没有什么实际意义,可以不要。

溶液2是碱液,目的在彻底破坏细胞膜,释放核酸。

溶液3是酸性钾盐溶液,目的是中和碱性并且沉淀SDS同时被沉淀的还有蛋白和大片段线性DNA。

扩展资料:

人们使用碱与SDS裂解法从E. coli(大肠杆菌)中分离制备质粒DNA已有30多年的历史。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中,会使细胞壁破裂,染色体DNA和蛋白质变性,将质粒DNA释放到上清中。

尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏,闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离,这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要OH-处理的强度和时间不要太过,当pH值恢复到中性时,DNA双链就会再次形成。

参考资料来源:百度百科-质粒抽提

回答2:

用碱裂解法提取质粒DNA的加入溶液,一溶液二溶液三后,他们的现象是不一样的,看出来是明显有区别的原因,是他们反应的过程是不一样的,化学反应也是不一一样的

回答3:

葡萄糖是使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部;EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂,其主要目的是为了螯合二价金属离子从而达到抑制DNase的活性;可添加RNase A消化RNA

回答4:

这些现象具体的话应该是分解现象,原因应该是产生了一些化学变化。

回答5:

你像你像你就得见到你容易考试